אמונין,ידוע גם בשם CRF (Ovine) Trifluoroacetate, זהו צורה של trifluoroacetate של גורם משחרר קורטיקוטרופין (CRF) המופק מכבשים ומסונתז. בדרך כלל הוא נראה לבן, שהוא צבע אופייני במצבו הטהור. במקרים מסוימים, עקב הבדלים בתהליכי ההכנה או תנאי האחסון, הצבע עשוי להשתנות מעט, אך בדרך כלל נשאר בטווח של לבן עד לבן. חומר זה הוא בעיקר בצורת אבקה, מה שהופך אותו קל לאחסון ושימוש. בנוסף, היא עשויה להתקיים גם בצורת אבקה-מיובשת בהקפאה, שעוזרת לשמור על יציבותה ופעילותה. תפקידו הפיזיולוגי העיקרי הוא לעורר את שחרור ההורמון האדרנוקורטיקוטרופי (ACTH) מבלוטת יותרת המוח הקדמית. ACTH פועל בנוסף על קליפת יותרת הכליה, ומקדם את הסינתזה והשחרור של גלוקוקורטיקואידים כגון קורטיזול. תהליך זה הוא מרכיב חשוב בציר יותרת הכליה של יותרת המוח ההיפותלמוס (ציר HPA), שהוא חיוני לשמירה על תגובת הלחץ של הגוף, חילוף החומרים האנרגטי ותפקוד מערכת החיסון.
טופס המוצרים שלנו
אמונין COA
 |
||
| תעודת ניתוח | ||
| שם מורכב | CRF(Ovine) Trifluoroacetate | |
| צִיוּן | ציון פרמצבטי | |
| מס' CAS | 79804-71-0 | |
| כַּמוּת | 15g | |
| תקן אריזה | שקית PE + שקית נייר כסף | |
| יַצרָן | Shaanxi BLOOM TECH Co., Ltd | |
| מגרש מס' | 202501090026 | |
| MFG | 9 בינואר 2025 | |
| EXP | 8 בינואר 2028 | |
| מִבְנֶה |
|
|
| פָּרִיט | תקן ארגוני | תוצאת ניתוח |
| הוֹפָעָה | אבקה לבנה או כמעט לבנה | תואם |
| תכולת מים | פחות או שווה ל-5.0% | 0.39% |
| הפסד בייבוש | פחות או שווה ל-1.0% | 0.26% |
| מתכות כבדות | Pb פחות או שווה ל-0.5ppm | N.D. |
| כפחות או שווה ל-0.5ppm | N.D. | |
| Hg פחות או שווה ל-0.5ppm | N.D. | |
| CD פחות או שווה ל-0.5ppm | N.D. | |
| טוהר (HPLC) | גדול או שווה ל-99.0% | 99.99% |
| טומאה יחידה | <0.8% | 0.53% |
| ספירת חיידקים כוללת | פחות או שווה ל-750cfu/g | 99 |
| אי קולי | פחות או שווה ל-2MPN/g | N.D. |
| סלמונלה | N.D. | N.D. |
| אתנול (על ידי GC) | פחות או שווה ל-5000ppm | 400 עמודים לדקה |
| אִחסוּן | אחסן במקום אטום, חשוך ויבש מתחת ל-20 מעלות | |
|
|
||
| נוסחה כימית | C205H339N59O63S |
| מסה מדויקת | 4667.49 |
| משקל מולקולרי | 4670.38 |
| M/Z | 4669.49 (100.0%),4668.49 (90.6%),4670.50 (73.1%),4667.49 (40.9%),4671.50 (39.5%),4670.49 (21.8%),4669.49 (19.8%),4672.50 (16.2%),4671.50 (12.9%),4670.49 (11.7%),4671.49 (11.3%),4668.48 (8.9%),4672.50 (5.7%),4669.49 (5.3%),4671.49 (4.6%),4671.49 (4.5%),4673.50 (4.3%),4670.48 (4.1%),4673.51 (3.9%),4672.50 (3.6%),4672.50 (3.1%),4672.50 (2.9%),4672.49 (2.3%),4669.48 (1.8%),4673.49 (1.8%),4671.49 (1.6%),4670.48 (1.3%) |
| ניתוח אלמנטים | C,53.69; H,6.87; N,19.50; O,17.59; S,2.35 |
אמונין(CRF(Ovine)Trifluoroacetate) היא מולקולה רגולטורית ליבה של ציר יותרת המוח ההיפותלמוס (ציר HPA) ביונקים, בעלת תפקיד מכריע בתגובת מתח, ויסות רגשות ואיזון מטבולי. CRF (Ovine) Trifluoroacetate, כאנלוג CRF שמקורו בכבשים, הפך לכלי חשוב לחקר הפונקציות הפיזיולוגיות של מערכת ה-CRF ופיתוח תרופות בשל הספציפיות והיציבות הגבוהות שלה.
בסיס מולקולרי ושינוי כימי של CRF (Ovine)
מקור ומאפיינים מבניים של CRF טבעי
CRF בודד וטוהר בתחילה מההיפותלמוס של כבשים על ידי Vale ומדענים אחרים בשנת 1981. רצף חומצות האמינו שלו הוא:
H-Ser-Gln-Glu-Pro-Pro-Ile-Ser-Leu-Asp-Leu-Thr{{ 11}}Phe-His-Leu-Leu-Arg-Glu-Val-Leu-Glu-Met{{21 }}Thr-Lys-Ala-Asp-Gln-Leu-Ala-Gln-Gln-Ala- שלו-Ser-Asn-Arg-Lys-Leu-Leu-Asp-Ile-Ala-NH2
רצף זה מכיל 41 חומצות אמינו עם משקל מולקולרי של כ-4.7 kDa, עם סרין (Ser) בקצה ה-N- ושינוי amidation של אלנין (Ala) בקצה ה-C-. ההומולוגיה של חומצות אמינו בין CRF של כבשים ל-CRF של בני אדם היא 95%, עם הבדלים רק בעמדות 7, 10, 13, 16, 21, 23, 26, 28, 31, 34 ו-38, אך הפונקציות נשמרות מאוד.
משמעות כימית של שינוי Trifluoroacetate
CRF (Ovine) Trifluoroacetate (מספר CAS: 79804-71-0) הוא תרכובת מלח שנוצרת על ידי שילוב של קצה הקרבוקסיל של CRF עם חומצה טריפלואורית (TFA). היתרונות של שינוי TFA כוללים:
מסיסות מוגברת: הקבוצה החומצית החזקה (- COCF ∝) של TFA יכולה להגביר את המסיסות של פפטידים בממיסים אורגניים, מה שמקל על פעולות ניסוי.
מבנה פפטיד יציב: TFA מפחית צבירה ופירוק פפטידים על ידי יצירת גשרי מלח, ומאריך את מחצית החיים.
שמירה על פעילות ביולוגית: CRF שונה עדיין יכול להיקשר ביעילות לקולטן CRF (CRFR), תוך שמירה על המאפיינים התפקודיים של מולקולות טבעיות.
שיטת סינתזה ובקרת איכות
CRF (Ovine) Trifluoroacetate מוכן בדרך כלל על ידי סינתזת פפטיד מוצק-(SPPS), כאשר שרשראות הצד של חומצות האמינו מוגנות על ידי קבוצות הגנה Fmoc או Boc, מחוברות בהדרגה ליצירת שרשרת פוליפפטידית ליניארית, ולבסוף נחתכות על ידי שרף TFA ומטוהרות. תקני בקרת האיכות כוללים:
טוהר: כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC) מזהה טוהר של יותר או שווה ל-98%.
אימות משקל מולקולרי: ספקטרומטריית מסה (MS) מאשרת שהמשקל המולקולרי תואם את הערך התיאורטי.
בדיקת פעילות ביולוגית: ודא את יכולתו לעורר הפרשת הורמון אדרנוקורטיקוטרופי (ACTH) באמצעות ניסויים בתאים חוץ גופיים (כגון AtT-20 תאי גידול יותרת המוח).
מנגנון סיווג והעברת אותות של קולטני CRF
מבנה והפצה של קולטני CRF
קולטן ה-CRF שייך למשפחת הקולטן המוצמד לחלבון מסוג B-(GPCR), הכוללת שני תת-סוגים: CRF ₁ R ו-CRF ₂ R
CRF ₁ R: תפוצה רחבה במערכת העצבים המרכזית (כגון קליפת המוח, היפוקמפוס, אמיגדלה) וברקמות היקפיות (כגון בלוטת יותרת המוח, בלוטת יותרת הכליה, שליה).
CRF ₂ R: מתבטא בעיקר בגרעין הפרה-חדרי של ההיפותלמוס, לוקוס coeruleus, חוט השדרה ורקמות היקפיות כגון הלב, כלי הדם ומערכת העיכול.
ההומולוגיה של רצפי חומצות אמינו בין שני הקולטנים מגיעה ל-70%, אך ישנם הבדלים בספציפיות של קישור הליגנד: ל-CRF ₁ R יש זיקה גבוהה יותר ל-CRF מאשר ל-CRF ₂ R, הנוטה להיקשר לליגנדים ממשפחת Urocortin (UCN).
מסלול איתות צמוד חלבון G
לאחר הקישור לקולטן, CRF מקדם פעילות אדנילט ציקלאז (AC) על ידי הפעלת חלבון G s, מה שמוביל לעלייה ברמות האדנוזין מונופוספט (cAMP) תוך תאי, אשר בתורו מפעיל חלבון קינאז A (PKA) ומולקולות איתות במורד הזרם כגון CREB. בנוסף, CRF יכול להפעיל פוספוליפאז C (PLC) דרך חלבון G q, לעורר גיוס יוני סידן (Ca ² ⁺) והפעלת חלבון קינאז C (PKC).
צמתי האות העיקריים הם
מסלול CAMP PKA: מסדיר את הפרשת ACTH, מטבוליזם של גלוקוז וביטוי גנים.
Ca ² ⁺ - מסלול PKC: מעורב בוויסות עוררות נוירונים ובפלסטיות סינפטית.
מסלול MAPK: מתווך תגובות אדפטיביות לטווח ארוך-(כגון הישרדות נוירונים) באמצעות זרחון ERK1/2.
מנגנונים של דה-סנסיטיזציה של קולטן ואנדוציטוזיס
חשיפה ארוכת טווח ל-CRF יכולה להוביל לחוסר רגישות לקולטן, המתבטאת בירידה ביעילות הצימוד של חלבון G וזרחון קולטן. חוסר הרגישות של CRF ₁ R מסתמך בעיקר על אנדוציטוזיס בתיווך -, בעוד שיעילות האנדוציטוזיס של CRF ₂ R נמוכה יחסית, מה שעשוי להיות קשור להבדלים בלקליזציה התת-תאית של הקולטן. לאחר אנדוציטוזה, ניתן למחזר קולטנים לממברנת התא או להיכנס לליזוזומים לצורך פירוק, דבר חיוני לשמירה על הומאוסטזיס תפקודי של הקולטן.
תעשיית התרופות
כמגיב אבחוני להערכת תפקוד יותרת המוח
אמוניןהוא מגיב האבחוני המוזהב להערכת תפקוד ציר יותרת הכליה של יותרת המוח. מנגנון הפעולה שלו הוא כדלקמן:
גירוי הפרשת ACTH: לאחר הזרקה תוך ורידית של CRF (Ovine), ניתן להפעיל במהירות את CRF ₁ R בבלוטת יותרת המוח הקדמית, ולקדם את הסינתזה והשחרור של ACTH.
קידום עקיף של הפרשת קורטיזול: ACTH חודר לזרם הדם ופועל על קליפת האדרנל, גורם להפרשת קורטיזול. על ידי זיהוי שינויים ברמות ACTH וקורטיזול בפלזמה, ניתן להעריך את המצב התפקודי של בלוטות יותרת המוח ובלוטת יותרת הכליה. ניתן להשתמש בו לאבחנה מבדלת של תסמונת קושינג. לחולים עם תסמונת קושינג יש הפרשת קורטיזול תלוית ACTH, אך הסיבה עשויה להיות אדנומה של יותרת המוח (מחלת קושינג) או תסמונת ACTH חוץ רחמית. מבחן הגירוי CRF (Ovine) יכול להבחין בין ACTH לקורטיזול על ידי התבוננות בדפוסי התגובה שלהם.
מחלת יותרת המוח Cushing מאופיינת בתגובה מוגברת של בלוטת יותרת המוח ל-CRF (Ovine), עם רמות גבוהות משמעותית של ACTH וקורטיזול. תסמונת ACTH אקטופית מתייחסת להפרשה של ACTH על ידי אדנומות לא תפקודיות של יותרת המוח או גידולים חוץ רחמיים, שאינם מגיבים ל-CRF (Ovine). חולים עם אי ספיקה ראשונית של יותרת הכליה (כגון מחלת אדיסון) סובלים מתגובה מוחלשת ל-ACTH עקב עלייה ברמת קליפת יותרת הכליה לאחר הרס של קליפת יותרת הכליה (CRFOvin) גירוי; לחולים עם אי ספיקת יותרת הכליה המשנית (כגון נגעים בהיפופיזה) יש הפרשת ACTH מופחתת, מה שמוביל לירידה בתגובת הקורטיזול.
תרכובות כלים בפיתוח תרופות
למערכת ה-CRF יש תפקיד מכריע בהפרעות רגשיות כמו חרדה ודיכאון, ונוגדי CRF ₁ R הפכו לנושא חם בפיתוח תרופות נוגדות חרדה/דיכאון. CRF (Ovine) Trifluoroacetate משמש כתרכובת כלי לניסויי קישור לקולטן כדי לסנן אנטגוניסטים של CRF ₁ R בעלי זיקה גבוהה ולהעריך את יכולת הקישור התחרותית שלהם. ניסויים פונקציונליים נערכו כדי לאמת את ההשפעה המעכבת של אנטגוניסטים על הפרשת ACTH המושרה על ידי CRF (Ovine) במודל תא. מחקרי מודלים בבעלי חיים משתמשים במודלים של חרדה כמו התנהגות המושרים על ידי CRF (Ovine), כגון מבחני מבוך מוגברים, כדי להעריך את ההשפעות נוגדות החרדה של אנטגוניסטים.
תרופות מייצגות:
Verucerfont: ניסויים קליניים שלב II הושלמו והוכחו כיעילים בטיפול בהפרעת חרדה כללית (GAD).
Pexacerfont: משמש לטיפול בדיכאון על ידי עיכוב CRF ₁ R כדי להקל על תגובת הלחץ.
פיתוח אגוניסטים של CRF2 R
CRF2R ממלא תפקיד חשוב בהגנה על הלב וכלי הדם והסתגלות למתח, תוך כדיאמוניןe משמש עבור:
מחקר סלקטיביות קולטנים: הבחנה בין ההבדלים התפקודיים בין CRF 1 R ו-CRF2 R כדי להנחות את התכנון של אגוניסטים סלקטיביים.
מודל מחלות לב וכלי דם: במודלים של אוטם שריר הלב, אגוניסטים של CRF ₂ R (כגון UCN2) יכולים להפחית אפופטוזיס של תאי שריר הלב ולשפר את תפקוד הלב.
שאלות נפוצות
מדוע מקורו של CRF ספציפית מ"כבשים" במקום ממקורות אנושיים או חולדות?
+
-
בשל תכונותיו הפרמקולוגיות הייחודיות. בהשוואה ל-CRF של אדם או חולדה, ל-CRF של כבשים (oCRF) יש זיקה חזקה יותר לקולטן CRF מסוג 1 ומחצית חיים ארוכים יותר in vivo, מה שיוצר תגובה חזקה יותר ומתמשכת לשחרור ACTH, מה שהופך אותו לפפטיד כלי סטנדרטי ורגיש יותר למחקר בסיסי ובדיקות אבחון.
מה משמעות הסיומת 'טריפלואורואצטט'? האם זו צורת מלח נפוצה בתרופות?
+
-
זהו תוצר לוואי שכיח בתהליך הטיהור וההכנה של תרכובות פפטידים. חומצה טריפלואורית היא רכיב פאזה ניידת חומצית המשמשת לטיהור פפטידים על ידי כרומטוגרפיה נוזלית בביצועים- גבוהים, שיכולה להישאר במוצר הסופי וליצור מלחים. זה אינו מרכיב פעיל וכמויות קורט מותרות בדרך כלל בתכשירים ביולוגיים.
כיצד זה עוזר לחשוף את הקשר הישיר בין התנהגויות "מתח" ו"חרדה" במחקר מדעי?
+
-
הזרקת oCRF ישירות לאזורים ספציפיים במוח החי (כגון האמיגדלה) יכולה לעקוף את המערכת האנדוקרינית ולהפעיל ישירות נוירוני CRF מרכזיים, ובכך לעורר התנהגויות דמויות חרדה אופייניות (כגון ערנות מוגברת והתנהגות חקרנית מופחתת). זה מספק ראיות סיבתיות ישירות למעגלים העצביים המובילים לחרדה הנגרמת על ידי מתח.
מלבד גירוי בלוטת יותרת המוח, מהם תפקידיה הפחות מוכרים במערכת החיסון?
+
-
תאי חיסון, כגון תאי T ומקרופאגים, מבטאים גם קולטני CRF. OCRF יכול לווסת ישירות את תפקודם של תאי מערכת החיסון, כגון עיכוב שחרור גורמים דלקתיים על ידי מקרופאגים והשפעה על ריבוי לימפוציטים. זוהי מולקולת מפתח מחברת ברשת החיסון הנוירואנדוקרינית.
מדוע זה כלי אידיאלי ללימוד ויסות המשוב השלילי של ציר יותרת המוח ההיפותלמוס?
+
-
על ידי מתן מינונים אקסוגניים וסטנדרטיים של oCRF, ניתן לערער במדויק על ציר HPA, ולנטר את קינטיקה של השחרור וערכי השיא של ACTH וקורטיזול. זה יכול לשקף ברגישות את ההיענות של בלוטת יותרת המוח ל-CRH ואת עוצמת המשוב השלילי של קורטיזול, המשמש להערכת שלמות תפקוד ציר HPA.
תגיות פופולריות: אמונין, סין יצרנים, ספקים של אמונין
